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乳酸脫氫酶誘導顳下頜關節骨關節病動物模型

更新時間:2018-07-06點擊次數:2364

乳酸脫氫酶誘導顳下頜關節骨關節病動物模型

(1)復制方法  體重為2.0~2.5kg,經檢查無牙頜畸形的雌性成年新西蘭兔,按1mg/kg體重的劑量經耳緣靜脈注射2.5g/L的戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉后,無菌條件下只在雙側顳下頜關節(temporomandibular joint, TMJ)作關節上腔穿刺,低濃度組在雙側TMJ上腔均注射100U LDH(用0.9%生理鹽水配制)0.1ml;高濃度組只在雙側TMJ上腔均注射200單位LDH 0.1ml。穿刺或注射后分別于24h,1、4、8、12周行過量注射麻醉藥方法處死動物,取顳下頜關節標本觀察。 TMJ穿刺方法在兔子外眥后下方可捫及兩個小結節,分別為眶下緣和髁突后極。作TMJ穿刺時,在兩個小結節之間進針,針頭指向前、內、下,均與眶下緣平行,進針約0.5cm后,可有脫空感,回抽無血,偶爾有少許黏稠淡黃色液體,即關節液,注射藥物后可回抽,此時表明針尖在TMJ腔內。

(2)模型特點  模型動物各個時間段關節病變程度有所不同,高濃度組病變程度均較低濃度組病變嚴重。光學顯微鏡下:早期(1~4周)未見明顯病變。后期(4~12周),纖維軟骨層變薄,纖維軟骨各層結構排列紊亂,關節盤膠原纖維玻璃樣變性,滑膜增厚細胞成分增多,部分區域骨質暴露,髁突部分區域骨質變性,關節盤膠原纖維變性,斷裂。掃描電鏡下早期(1~4周)關節各結構表面未見明顯異常。后期(4~12周),關節盤上表面凝膠層變薄,網狀的膠原纖維暴露,凝膠層物質脫落,關節盤表面波紋變淺,甚至消失,髁突表面波紋變淺,凝膠層剝脫,網狀膠原纖維絲暴露,大量膠原纖維束卷起裸露,在髁突前斜面功能區,波紋結構消失,凝膠層變薄。大量膠原纖維絲暴露。模型動物均于注射后4周出現特征性骨關節病病損,并可隨時間推移而加重。

(3)比較醫學  本模型采用病理組織學、掃描電鏡等研究手段,對模型動物各時間段關節軟骨關節盤病變進行了觀察,發現病變損傷與其他方法如腫瘤壞死因子(TNF)、牙合創傷等引起的關節損害相似,說明本模型制作方法具有良好的可比性,符合動物模型的基本要求。由于未觀察到模型動物的關節盤有穿孔現象,說明本模型的關節病變處于早、中期,因此所建立的動物模型適用于早、中期關節病變的實驗研究。采用本方法誘導的兔TMJ OA模型,制作方法簡便易行,病變典型,且兔及乳酸脫氫酶均容易獲得,價格適宜,是較為理想的動物模型。

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