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子宮內膜異位癥模型構建

產品簡介

子宮內膜異位癥模型構建:子宮內膜異位癥(Endometriosis, EMT)模型的構建是研究其發病機制及藥物療效的關鍵。

產品型號:
更新時間:2025-05-13
廠商性質:代理商
訪問量:1206
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一、建模方法分類

1. 自體移植模型(主流方法)

基于"經血逆流種植學說",通過手術將自體子宮組織移植至腹腔或特定部位誘導異位生長。

  • 經典操作步驟

    1. 動物選擇:雌性未交配SD或Wistar大鼠(180-270g),動情周期規律

    2. 術前處理:皮下注射苯甲酸雌二醇(30-150 μg/kg)以促進子宮內膜增殖。

    3. 組織獲取:麻醉后開腹切除1-1.5cm子宮角,縱行剖開并修剪成5×5mm內膜片。

    4. 移植部位

  • 腹壁肌肉層(血管豐富區,成功率>80%)

  • 卵巢附近或子宮骶韌帶(模擬盆腔EMT)
    5. 固定方式:無損傷縫線將內膜面朝向腹腔縫合,保留肌層以促進血管生成。

  • 術后處理

    • 預防性抗生素(如青霉素)及二次雌激素注射維持激素環境

    • 4-8周后開腹評估移植物體積(≥8mm3)及病理特征

2. 同種異體移植模型

用于藥物篩選時避免供體-受體個體差異干擾:

  • 操作要點

    • 供體鼠子宮內膜碎片經RPMI1640培養基處理后腹腔注射至受體鼠

    • 受體鼠需同步激素處理(雌二醇每4天注射,共2次)

  • 優勢:標準化移植組織量,適合高通量藥效評價

3. 誘導型模型

通過激素或藥物干預模擬EMT病理環境:

  • 激素誘導

    • DES(二乙基甲合資藥物)聯合手術,促進血管生成及炎癥反應

    • 雌孕激素比例失調:高劑量雌二醇+低孕酮環境

  • 藥物干預

    • GnRH拮抗劑(如Cetrorelix)緩釋植入,誘導慢性低雌激素狀態

    • 亮丙瑞林微球抑制垂體-性腺軸,評估病灶wei縮效果

4. 基因工程模型

新興技術用于機制研究:

  • 熒光標記模型:CFP轉基因鼠子宮內膜碎片移植,實現病灶實時追蹤

  • 基因敲除模型:針對VEGF、COX-2等靶點構建,但成本高且周期長

二、模型驗證指標

1. 形態學評估

  • 肉眼觀察:移植物呈囊狀隆起,內含黏液或血性液體,血管網豐富

  • 體積測量:游標卡尺或光聲成像(PAI)動態監測病灶大小及氧飽和度

  • 組織病理學

    • H&E染色:腺體擴張、乳頭狀增生,腺上皮柱狀化

    • Masson染色:評估纖維化程度

    • PAS染色:檢測糖原沉積(異位內膜特征)

2. 生化與分子指標

  • 激素水平

    • 血清雌二醇(E2)升高,孕酮(P4)降低,E2/P4比值失調

    • 垂體GnRHR mRNA表達下調提示中樞調控異常

  • 炎癥與血管生成

    • IL-6、TNF-α、COX-2等促炎因子升高

    • VEGF、FGF等血管生成標志物過表達

  • 增殖與凋亡

    • PCNA、Ki67陽性率增加(>30%)

    • Bcl-2/Bax比值失衡,Caspase-3活性降低

3. 功能學評估

  • 生育影響:模型鼠妊娠丟失率升高,胚胎著床數減少

  • 疼痛行為:機械性痛閾降低(需結合Von Frey纖維測試)


三、模型比較與適用場景

模型類型優勢局限性適用場景
自體移植模型操作簡單,成本低,成功率>80%易致腹腔粘連,病理異質性藥物篩選、機制初步研究
同種異體模型標準化程度高需嚴格免疫匹配藥效對比研究
GnRH拮抗劑模型模擬激素治療反應周期長(3-6個月)新型激素療法開發
熒光標記模型實時動態監測需特殊設備,成本高昂病灶遷移機制研究

四、關鍵注意事項

  1. 動物選擇

    • 優先選用SD大鼠(性周期穩定,耐受性強)

    • 術前確認動情周期(陰道涂片法),選擇動情前期手術

  2. 技術細節

    • 移植組織需保留基底膜以維持腺體結構

    • 縫合時避免壓迫血管,確保血供

  3. 倫理與質量控制

    • 嚴格無菌操作,術后鎮痛(如布洛芬混懸液)

    • 設立假手術對照組(注射脂肪組織替代內膜)

  4. 創新方向

    • 結合MRI或PAI實現無創監測

    • 開發類器官共培養模型模擬異位微環境


五、典型應用案例

  1. 藥物評價

    • GnRH激動劑GenSci006顯著縮小病灶體積(抑制率>60%),降低E2水平

    • 中藥復方(如加味沒竭片)通過調控ERα/ERβ平衡抑制異位內膜增殖

  2. 機制研究

    • 熒光模型揭示VEGF介導的血管新生是病灶存活關鍵

    • 基因表達譜分析發現EMT相關通路(Wnt/β-catenin)異常激活


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