技術(shù)文章
Technical articles蛋白質(zhì)組一詞源于蛋白質(zhì)與基因組兩個詞的組合，意指“一種基因組所表達的全套蛋白質(zhì)”，即包括一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學本質(zhì)上指的是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征，包括蛋白質(zhì)的表達水平，翻譯后的修飾，蛋白與蛋白相互作用等，由此獲得蛋白質(zhì)水平上的關(guān)于疾病發(fā)生，細胞代謝等過程的整體而的認識。近兩年來蛋白質(zhì)組研究技術(shù)已被應用到各種生命科學領(lǐng)域，如細胞生物學、神經(jīng)生物學等。在研究對象上，覆蓋了原核微生物、真核微生物、植物和動物等范圍，涉及到各種重要的生物學現(xiàn)象，如信...
一、服務介紹免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性，將抗原（我們感興趣的靶蛋白）-抗體復合物從樣品中分離出來，達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后，樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化，定性檢測蛋白的目的，即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原（靶蛋白質(zhì)）特異性結(jié)合的抗體，抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復合物，再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育，通過離心得到免疫復合...
一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過...
1.選擇好的RNA分離方法現(xiàn)有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡單也是安全的方法是柱式分離，如RNApure因為操作簡單，時間短，純度高而受到大家的喜愛，RNApure不需要DNA酶消化DNA，節(jié)省了時間，避免RNA的降解，從而提高了產(chǎn)量；相對非柱式分離（如TRIZOL），去除蛋白及其他雜質(zhì)干凈，提高了純度，對于細胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇，植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質(zhì)、次生代謝物含量的影響，一般用TRIZOL提取純度不高，而且很...
1.迅速滅活內(nèi)源的RNA酶，以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活：1）用含離液（如胍鹽）的細胞裂解液收獲樣品，并立即勻漿。2）用液氮瞬間凍結(jié)樣品。值得特別注意的是：組織塊足夠小，在浸入液氮的瞬間就能凍結(jié)，以瞬間令RNA酶失活。3）立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑，能立即穩(wěn)定并保護完整、未凍結(jié)的組織和細胞樣品中的RNA。關(guān)鍵要點是組織樣品切片要夠薄（），這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...
Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）、已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細節(jié)1、試劑準備：試劑都在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中使用一次性吸頭，避免交叉污染；2．加樣：加樣時，...
血清的保存應該注意以下幾點：（1）生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預留體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補體...
一、成纖維細胞培養(yǎng)用人或動物胚體為好；動物可用小鼠或雞胚，去頭和內(nèi)臟，剪成小碎塊后，用胰蛋白酶消化法培養(yǎng)；如為人胚，可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包皮是培養(yǎng)成纖維細胞的很好對象。二、巨噬細胞培養(yǎng)1．實驗前三天，向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml（勿注入腸內(nèi)）。2．引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70％酒精中3～5秒。3．置動物于解剖臺上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè)，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。4．再用70％酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，...
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